Introducción: La caracterización de los adenovirus (AdV) es de gran utilidad, desde el punto clínico y epidemiológico, debido a su asociación con diferentes síndromes  y el valor pronóstico que ello implica en pacientes de diferentes grupos de riesgo. Objetivo: Caracterizar molecularmente los aislamientos de AdV obtenidos de muestras de pacientes de todo el país con infección respiratoria aguda (IRA) como parte del Programa Nacional de Vigilancia de las IRA, a partir de muestras colectadas entre los años 2010 y 2013. Métodos: La identificación de los aislamientos como AdV se realizó mediante reacción en cadena de la polimerasa (RCP) universal y se confirmó por un ensayo de inmunofluorescencia con anticuerpos monoclonales. Para la caracterización en especies y serotipos, se utilizaron metodologías de RCP en plataformas múltiples, que permiten definir diferentes serotipos en una sola reacción. Resultados: De los 58 aislamientos confirmados como AdV, se caracterizaron 49 y 9 quedaron sin tipificar, a pesar de ser positivos a la RCP universal. Se identificaron las especies B (34,6%) y C (65,3%), la cual predominó, en concordancia con numerosos trabajos epidemiológicos a nivel mundial. No se encontraron coinfecciones entre ambas especies. Los serotipos encontrados fueron AdV2 (n=29), AdV5 (n=3) y AdV3 (n=17). Conclusiones: Se identificaron las especies y los serotipos de AdV circulantes en Cuba en los últimos 4 años. Se hace necesario continuar con la vigilancia y caracterización de los AdV para estimar la contribución de estos serotipos a las IRA en Cuba y detectar la introducción de posibles variantes con potencial epidémico.